HUVEC 人臍靜脈內皮細胞

原代內皮細胞培養基，成分：88%原代內皮基礎培養基+10%FBS+1%P/S+1%原代內皮細胞培養添加劑 操作步驟： 復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒(méi)入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1min內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL*培養基的離心管內，1000-1200rpm 離心5min，棄去上清液，用1-2mL*培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養基的T25瓶 中，放入培養箱培養。 細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀(guān)察 消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見(jiàn)細胞層脫落， 即消化完成，否則繼續消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL*培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹 散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。； ④注意培養基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時(shí)，重復傳代操作或者 凍存。