細胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版） 主要用途 細細胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在通過(guò)含硫多肽底物以及特定抑 制劑存在與否的情況下，受到 MMP2 的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用 Ellman 試劑，產(chǎn)生黃色 5-巰基-2-硝 基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測定細胞裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該 技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或純化 酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶 2 的特異活性定量檢測，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無(wú)菌，即到即用， 操作簡(jiǎn)捷，性能穩定，安全可靠。 技術(shù)背景 細胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑是一類(lèi)結構高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內肽 酶的總稱(chēng)，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現的MMPs 至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)（extracellular matrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、 形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissue resorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節炎、癌 細胞浸入轉移等。根據降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi)：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要 消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱(chēng)明膠酶A、 B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、 MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、 MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。 體內絕大多數細胞并不儲備MMPs，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無(wú)活性 的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的 MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應?；|(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱(chēng)明膠酶A （gelatinase-A）或IV型膠原 酶（type IV collagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56 kDa。它在血清或細胞上清中濃 度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、 彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5 （laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋 白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；?含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性抑制劑OA-Hy 存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydryl group），進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙 （2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoic acid）；DTNB]反應后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸 （5-thio-2-nitrobenzoic acid；TNB），通過(guò)其吸收峰值的變化（412nm波長(cháng)），來(lái)定量測定細胞基質(zhì)金屬蛋 白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應系統為： 產(chǎn)品內容 清理液（Reagent A） 毫升 裂解液（Reagent B） 毫升 緩沖液（Reagent C） 毫升 反應液（Reagent D） 毫升